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第359章

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出纯合基因型与杂合基因型,提供完整的遗传信息。

DNA分子标记可分为哪几类?

(1)基于DNA-DNA(分子)杂交的分子标记

(2)基于PCR技术的分子标记

(3)基于PCR和限制性酶切相结合的分子标记

(4)基于DNA芯片杂交技术的分子标记

(5)针对特定结构域的分子标记

(6)高通量分子标记

3、试述限制性长度多态性(RFLP)标记产生的原理、特点和发展RFLP标记的基本步骤。

原理:(1)利用特定的限制性内切核酸酶消化不同生物个体的基因组DNA,所产生的DNA数目和各个片段的长度反映了DNA分子上不同酶切位点的分布情况

(2)琼脂糖凝胶电泳将这些片段按大小顺序分离开来,然后将它们按原来的顺序和位置转移至易于操作的尼龙膜和硝酸纤维膜。

(3)用放射性核素(如32P)或非放射性物质(如生物素、地高辛等)标记的DNA作为探针,与膜上的DNA进行杂交

(4)经放射自显影或酶学检测,可显示出不同材料对该探针的限制性酶切片段多态性情况

特点:基本特点:(1)所检测到的等位基因具有共显性特点

(2)RFLP标记位点数量不受限制,通常可检测到的基因座位数为1~4个

(3)RFLP探针主要有三种来源,即cDNA克隆、植物基因组克隆(RG克隆)和PCR克隆

RFLP的优点:(1)共显性标记,可鉴别杂合、纯合基因型

不需要检测对象的序列信息

不足:(1)RFLP分析的探针,必须是单拷贝或寡拷贝的,否则不能显示清晰可辨的带型

(2)检测所需样本DNA量大(5~15μg)

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